康宁基质胶为一种从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出的基底膜基质,主要成分包含层粘连蛋白、IV型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。为组织和细胞提供支撑、抗拉强度和支架支撑等。
康宁基质胶的冻融和成胶方法?
融化:在使用前一天,将基质胶小瓶浸入置于4度冰箱的冰中过夜解冻;解冻后,旋转小瓶以确保混匀。融化后的基质胶在15℃以上,会迅速凝固,操作的时候放置在冰上,防止过早凝固;与基质胶接触的所有培养器皿、耗材和培养液均应预冷,整个实验过程需始终保持基质胶置于冰上。对融化后的基质胶进行分装,需用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
成胶:根据具体实验设置,基质胶可用无血清培养基稀释,也可将培养的细胞与基质胶混合,三十七度放置三十分钟,即可成胶。
康宁基质胶使用注意事项有什么呢?
1. 长期保存(一个月以上)是零下八十度;
2. 根据每次使用量,分装基底膜基质胶,放置零下八十度冻存,避免反复冻融;
3. 要使用时,将冷冻的基底膜基质胶置于冰上,然后冰和基底膜基质胶一起置于温度二到八度的冰箱内,过夜解冻,这样可以充分融化,同时让胶保持在稳定低温环境;
4. 不要在温度二到八度保存基底膜基质胶超过一天,最好现融现用;
5. 温度超过十八度,基底膜基质胶将变成凝胶,所以操作时,所有耗材和工具预冷(如移液枪头),操作迅速;
6. 用预冷的细胞培养基稀释基底膜基质胶。